固相萃取 (SPE) 系統

聯用技術領域的發展

聯用技術領域的發展是使用固相萃取 (SPE) 系統作為液相色譜 (LC) 與 NMR 之間的接口。

循環收集和轉移（BPSU-36/2）是 LC-NMR 中常用的分析技術。但是，樣品是在色譜系統提供的原始洗脫液和濃度狀態下進行測量的。（質子化的）洗脫液對有限進樣量導致的低濃度樣品的干擾是無法避免的。

在LC-SPE NMR 過程中，色譜儀完成分離，相應的峰則被一一固定在色譜柱后的固相萃取柱上。

峰選擇是通過 UV 檢測器或通過在線的 MS 或 MSn 譜圖完成。被固定的色譜峰樣品可進行 NMR 測量（洗滌、干澡 ...），NMR 波譜儀配備了一個特殊的流動探頭，并通過毛細管連接到固相萃取系統。色譜峰樣品借助適當的（氚代）溶劑通過毛細管直接流入 NMR 探頭。

特點

色譜分離可以借用廉價的非氚代溶劑，甚至是與 NMR 波譜不兼容的添加劑
由于洗脫劑中沒有D2O ，色譜分離過程中就沒有 H-D 交換產生，從而能夠獲得正確的質量信息

轉移僅需要小量（大約 300 微升）氚代溶劑。

完整樣品是被固相萃取柱中的少量體積的（小于 30 微升）液體洗脫的。由于這種富集效應，檢測靈敏度增加 2 至 4 倍，尤其是對于更寬的峰而言這種效果更好。
通過色譜分離后的相同樣品的多次富集，樣品量和濃度會進一步增加，靈敏度能夠提高 10 倍或以上。

于洗脫和轉移的氚代溶劑不受色譜條件的影響，可以提高譜圖質量，能夠在 NMR 觀察到可交換質子。

對于此類型的分析，布魯克公司現在提供一個完整的 SPE-NMR 系統。該系統包括:
布魯克∕Spark Prospekt II 固相萃取系統。

HyStar 軟件包，在自動化條件下控制整個流程。

流動 NMR 探針，其檢測容量可根據樣品洗脫峰的體積進行調整。

這種新系統為 LC 和 NMR 的聯用打開了新局面：

對濃度要求較高的 LC-NMR 的異核實驗之前僅可能在有限的案例中進行，但是現在已經成為標準實驗。

HSQC 和 HMBC 等類型實驗使得利用 LC-(SPE) NMR 進行*未知物的結構鑒定成為現實，這項技術可以用于諸如植物提取物的篩選。

鑒于 LC-NMR 主要用在場強為 500 MHz 和更高的磁場，借助 SPE，LC 和 NMR 的聯用在較低強度磁場的應用前景更為廣闊。